细胞简介：

乳腺导管位于胸部的皮下组织中，是的主要构成组织之一，也是乳汁的排泄管道。乳腺管的主要功能是乳汁的排泄和储存每个乳腺叶都有一个输乳管，输乳管会在近处形成膨大的输入管窦，末端变细并开口于。

乳腺被结缔组织分隔为 15-25个 叶，每个叶又分为若干小叶，每个小叶是一个复管泡状腺。腺泡上皮为单层立方或柱状，导管包括小叶内导管、上间导管和总导管。小叶内导管多为单层柱状或立方上皮，小叶间导管为复层柱状上皮，总导管又称输乳管，开口于，管壁为复层扁平上皮，下表皮相续。

细胞特性：

1）细胞来源于实验动物正常乳腺组织。

2)细胞鉴定：细胞角蛋白（PCK）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

永利集团网址推荐使用 DELF 原代 上皮 细 胞培养体系 作为体外培养的培养基。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和永利集团网址联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和永利集团网址联系，告知细胞的具体情况，以便永利集团网址的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

细胞AURORA-A激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

细胞GSK-3BETA蛋白表达比色法定量检测试剂盒

淀粉分支酶（SBE）测试盒

胞浆微型RNA（miRNA）超滤法分离试剂盒

小鼠胱天蛋白酶3(Casp-3)elisa检测试剂盒

细胞C-MET激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C）

人Podocin elisa分析检测试剂盒

大鼠β-防御素(β-Defensins)elisa检测试剂盒

小鼠生长(GH)elisa检测试剂盒

乙酰化化组蛋白H2B (Lys15)鼠单克隆抗体 Histone H2B (Acetyl K16)

尤文氏肉瘤相关EWS蛋白抗体 EWSR1

二肽氨基肽酶3抗体 DPP3

防御素β1/Defensin β1抗体 Defensin beta 1

Grp94相邻核苷酸酶抗体 NT5DC3

G蛋白偶联受体21抗体 GPR21

囊泡转运蛋白SFT2C抗体 SFT2C

内质网脂质转运相关蛋白2抗体 SPFH2

AF488标记的抗小鼠Ly-6G/Ly-6C单克隆抗体 mouse Ly-6G/Ly-6C, Alexa Fluor 488 conjugated

AF680标记的脂联素受体1抗体 Adiponectin Receptor 1, Alexa Fluor 680 conjugated

胶原三股螺旋重复蛋白1抗体 CTHRC1

精酶2抗体 Arginase II

SETD6蛋白抗体 SETD6

SYCE1蛋白抗体 SYCE1

源盒蛋白HOXA9抗体 HOXA9

味觉感受器蛋白T2R6抗体 T2R6

小鼠CD4分子(CD4)elisa检测试剂盒

大鼠脯羟化酶(PHD)elisa生化检测试剂盒

PHD ELISA Kit

豚鼠白介素18(IL-18)elisa生化检测试剂盒

兔乳腺导管上皮细胞IL-18ELISAKit