细胞简介：

膀胱逼尿肌具有一定外加张力作用下自发兴奋收缩的能力，且不能被神经阻滞抑制，说明膀胱可以发生肌源性的收缩。

有学者用组化的方法在膀胱内发现了与胃肠道 Cajal间质细胞类似的细胞。目前学术界普遍认为Cajal细胞在膀胱中充当起搏细胞的角色，Cajal细胞存在于膀胱平滑肌束周围，与神经关系密切。

细胞特性：

1） 组织来源于实验动物的正常膀胱组织。

2) 细胞鉴定：c-kit荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5) 细胞生长方式：梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

永利集团网址推荐使用 delf原代间质 细胞培养体系 作为该细胞的培养试剂。

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和永利集团网址联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和永利集团网址联系，告知细胞的具体情况，以便永利集团网址的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。

公司正在出售的产品：

大鼠白介素2可溶性受体α链(sIL-2Rα/CD25)检测试剂盒 ，英文名： sIL-2Rα/CD25 ELISA Kit

Mouse ierleukin -5 (IL-5) ELISA Kit 小鼠白介素-5(IL-5)检测试剂盒

ELISA 小鼠类胰岛素生长因子-2(mouse IGF-2)  进口分装

CLIAKitforINH-AELISAKit大鼠抑制素A

通用型谷同酸转氨酶(GPT)活性光谱法定量检测试剂盒20次

ELISAKitf-βCG大鼠游离β绒毛膜

NTRK2重组人 TrkB / NTRK2 蛋白 Protein

Ⅱ(F2)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor II (F2)

CGA重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 Protein

EPHA4 Protein Human 重组人 EphA4 蛋白

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

Ⅱ(F2)重组蛋白 Recombinant Coagulation Factor II (F2)

EPHA4 Protein Human 重组人 EphA4 蛋白

NTRK2重组人 TrkB / NTRK2 蛋白 Protein

HA Protein H7N9 重组甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

CGA重组人 FSH alpha / TSH alpha / CGA 蛋白 Protein

小鼠基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human neurotensin () ELISA Kit 人神经降压素()检测试剂盒

Humanplateletbasicprotein,PBPELISAKit 人血小板碱性蛋白(PBP/CXCL7)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Humanai-hepatitisBviruseaibody,HBeAb检测试剂盒人抗乙型肝病毒e抗体(HBeAb)检测试剂盒规格：96T/48T

植物0脂酶D(PhospholipaseD)总活性比色法定量检测试剂盒20次

humanversican/PG-M/PG-350,VSELISAKit人多功能蛋白聚糖(VS)检测试剂盒规格：96T/48T

大鼠膀胱间质细胞小鼠白细胞介素25（IL-25）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠白细胞分化抗原30(CD30)检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装

小鼠白三烯E4（LTE4）检测试剂盒   96T/48T   试剂盒   组装/原装