① 组织块培养法

组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

② 消化培养法

③ 悬浮细胞培养法

对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

④器官培养

器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

产品名称：小鼠皮肤成纤维细胞

英文名称：Mouse primary skin fibroblasts

组织来源：皮肤组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

小鼠成纤维细胞属于由中胚层分化而来的间质细胞。由于这些细胞非常容易培养，它们已经被广泛用于细胞和分子生物学研究中。

一般而言，成纤维细胞能够分泌 I型和III型胶原等细胞外基质，并且研究表明不同器官中的成纤维细胞有显著的不同。伤口修复时，真皮成纤维细胞由可增殖，可迁移的表型变为有收缩性的，可重塑基质的表型，同时，它们会分泌大量的透明质酸来应对修复时的炎症反应。

细胞特性：

1）组织来源于实验动物小鼠的正常皮肤组织。

2)细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、、酵母和。

5)细胞生长方式：长梭形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

推荐培养基：

永利集团网址推荐使用 DELF原代 成纤维 细胞培养体系 作为该细胞的培养基。

取材→分离→培养和维持

1、取材

人和动物细胞的取材是原代细胞培养成功的首要条件，直接影响细胞的体外培养。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鲜和保鲜

② 应严格无菌

③ 防止机械损伤

④ 去除无用组织和避免干燥

⑤ 应注意组织类型、分化程度、年龄等

⑥ 作好记录

2、分离

人或动物体内(或胚胎组织)由于多种细胞结合紧密，不利于各个细胞在体外培养中生长繁殖，必须将现有的组织块充分散开，使细胞解离出来。

(1)悬浮细胞的分离方法

组织材料若来自血液、羊水、胸水或腹水的悬液材料，的方法是采用1000r/min的低速离心10分钟。经离心后由于各种细胞的比重不同可在分层液中形成不同层，这样可根据需要收获目的细胞。

(2)实体组织材料的分离方法

对于实体组织材料，由于细胞间结合紧密，为了使组织中的细胞充分分散，形成细胞悬液，可采用机械分散法(物理裂解)和消化分离法。

① 机械分散法

特点:简便、快速,但对组织机械损伤大，而且细胞分散效果差,适用于处理纤维成分少的软组织。

② 消化分离法

组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状)，应用酶的生化作用和非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动，使团块膨松，由块状变成絮状，此时再采用机械法，用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠瓶中振荡，使细胞团块得以较充分的分散，制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液，接种培养后，细胞容易贴壁生长。

小鼠多聚球蛋白受体(PIGR)elisa检测试剂盒

山羊Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)elisa分析检测试剂盒

发酵液丙三醇比色法定量检测试剂盒

猪磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)elisa检测试剂盒

大鼠血红素氧合酶2(HO2)elisa检测试剂盒

人体c-Ki-ras RFLP基因分析试剂盒

小鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)elisa分析检测试剂盒

大鼠CD44分子(CD44)elisa分析检测试剂盒

脂肪细胞增强结合蛋白1抗体 AEBP1

肿瘤坏死因子配体超家族成员13B抗体 TNFSF13B

肝黄素单加氧酶2抗体 FMO2

高迁移率族蛋白2重组兔单克隆抗体 HMGB2

KIAA1276蛋白抗体 KIAA1276

LSM14A蛋白抗体 LSM14A/C19orf13

醛缩酶C抗体 Aldolase C

人类缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp36抗体 HIV2 gp36

BCL2相关蛋白A1重组兔单克隆抗体 BCL2A1

CD19抗体 CD19

激酶受体A抗体 TrkA

磷酸二酯酶6β抗体 PDE6B

β分泌酶抗体 BACE1

氨基己糖苷酶D抗体 HEXDC

细胞色素B561结构域蛋白1抗体 CYB561D1

线粒体核糖体蛋白S31抗体 MRPS31

大鼠基质金属蛋白酶7(MMP-7)elisa分析检测试剂盒

脱氢酶抗体  Anti-SDH/Sorbitol Dehydrogenase

APC标记的驴抗羊IgG H&L

Donkey Anti-Goat IgG H&L / APC

小鼠皮肤成纤维细胞锌指蛋白450抗体

视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。

1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。

T-25培养瓶充满培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。

本公司的所有产品仅用于科学研究或者工业科研等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用