细胞简介：

大鼠肾上腺皮质分离自肾上腺组织；肾上腺是人体相当重要的内分泌器官，由于位于两侧肾脏的上方，故名肾上腺。肾上腺左右各一，位于肾的上方，共同为肾筋膜和脂肪组织所包裹。左肾上腺呈半月形，右肾上腺为三角形。从侧面观察，腺体分肾上腺皮质和肾上腺髓质两部分，周围部分是皮质，内部是髓质。肾上腺内部是髓质部分，分泌肾上腺素和。这些激素在应激状态释放增多，能够帮助升高血压，加快心率，升高血糖，动员全身的储备物质，为机体与外界环境的抗争作好充分准备。肾上腺外部是皮质部分，分泌醛固酮、和少量的雌雄激素。醛固酮能够促进小便中尿钾的排出和尿钠的重吸收，正常数量的醛固酮，对维持人体正常血压有重要作用。但是如果过多分泌，会导致高血压和低血钾。是人体必需的激素之一。当人体处于应激状态时，比如感冒，发烧，遇到突发事件的时候，肾上腺皮质分泌大量的，这些能够动员机体的存储能源，为应对内部或者外部重要事件提供充分的物质准备。当缺乏时，机体在遇到重大事件的时候，往往缺乏足够应对能力，容易被病毒或外界压力所击倒。肾上腺产生的雄激素，对男性来讲，并非，但是对女性而言，是雄激素的一个重要来源。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肾上腺皮质采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测

公司实验室分离的大鼠肾上腺皮质经3β-HSD免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-3代左右；2代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

实验报告：

一、分离与培养：

1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；

6、用PBS冲洗3次，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

植物钙调素(CAM)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物钙调0酸酶（CaN）试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物脯酸(proline)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物赤3(GA3)试剂盒     试剂盒   组装/原装

植物K1(VK1)ELISA 试剂盒

Human ai heparin PF4 complex aibody /HIT (HIT) ELISA Kit 人抗肝素PF4复合物抗体/HIT抗体(HIT)试剂盒

PorcineCoisolELISAKit 猪(Coisol)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAFP-L2ELISAKit小鼠小扁结合型甲胎蛋白/甲胎蛋白异质体2

血液B1高效液相色谱法定量试剂盒20次

Mousethrombusprecursorprotein,TpPELISAKit小鼠血栓前体蛋白(TpP)试剂盒

EDA2R重组大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白  Protein

GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素样肽-2蛋白

IL21重组人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein

ADAMTSL1 Protein Human 重组人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 (His 标签)

CXCL2 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签)

GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素样肽-2蛋白

ADAMTSL1 Protein Human 重组人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 (His 标签)

EDA2R重组大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白  Protein

CXCL2 Protein Mouse 重组小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 标签)

IL21重组人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白 Protein

大鼠肾上腺皮质细胞人组织多肽特异性抗原(TPS)ELISA 试剂盒

Rat apolipoprotein H (Apo-H) ELISA Kit 大鼠载脂蛋白H(Apo-H)试剂盒

Humanai-cytomegalovirusIgMaibody,ai-CMVIgMELISAKit 人抗巨细胞病毒抗体IgM(ai-CMVIgM)试剂盒 进口分装

HumanHelicobacterpyloricytotoxin-associatedgeneAproteinIgG,HP-CagA-IgG试剂盒人幽门螺杆菌细胞毒素相关基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)试剂盒

组织钙调蛋白(CaM)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次

HumanMaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit人基质金属蛋白酶1(MMP-1)试剂盒

注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和永利集团网址联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片，是正常现象。观察好细胞状态后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化，悬浮细胞直接混匀收集细胞，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中，置于培养箱中进行培养。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和永利集团网址联系，告知细胞的具体情况，以便永利集团网址的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞。收到细胞后次传代建议1：2传代 。

9.注意： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿。